外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——微流控技术。微流控是利用微纳米级尺寸的管道来处理和操控流体所涉及的一门技术,其在外泌体分离方面的应用受到越来越多学者的关注。Jie等人开发了一种三维纳米结构微流控芯片,微柱阵列通过化学沉积将交叉多壁碳纳米管功能化,然后其就可以识别特定的分子(CD63)并利用独特拓扑纳米材料高效的捕获外泌体。Wunsch等人利用硅工艺生产纳米级确定性侧向位移(Nano-DLD)芯片,得到了均匀的间隙尺寸,该芯片可以灵敏地将20~110nm的颗粒分离。该研究证明了外泌体基于大小的位移,从而揭示了利用芯片分选和量化纳米级生物胶体的潜力。外泌体载药药物载入方式多种多样,包括被动方式和主动方式两类。山东超声外泌体载药
Xin等人研究了装载miR-17-92团簇的间充质干细胞外泌体(MSC-Exo)对中风大鼠神经学功能的恢复作用。与脂质体处理组相比,MSC-Exo处理组的神经功能得到明显改善;与MSC-Exo对照组相比,富含miR-17-92团簇的MSC-Exo处理对缺血边界区中神经功能的改善和少突胶质细胞的发生,神经元树突可塑性的增强具有更优的作用。研究表明,MSC-Exo本身具有改善中风大鼠神经损伤的作用,而包载miR-17-92团簇之后该功能得到增强。另有研究发现,在中风大鼠模型中,载有丰富miR-133b的MSC-Exo除具有上述作用外,还能促进星形胶质细胞释放外泌体。在氧和葡萄糖剥夺条件下,富含miR-133b的MSC-Exo预处理星形胶质细胞能够产生外泌体,并且该外泌体有助于脑中风的神经修复。贵州外泌体载药hplc负载姜黄素的外泌体可经外泌体转运通过血脑屏障, 运送到脑组织中, 减轻氧化应激,维持脑血管屏障功能。
间充质干细胞外泌体(MSC-Exo)在外泌体载药中作为药物递送的载体具有独特优势。目前临床上普遍使用MSCs的原代细胞,虽然其可以产生大量的外泌体,但是对于大规模生产来说,它的增殖能力有限,产生的外泌体可能具有批次间的差异。Chen等人发现,使用c-myc转染人胚胎干细胞衍生的间充质干细胞(hESC-MSC),能够在不影响外泌体生产质量的前提下,提高MSCs的增殖率,缩短生产时间。转染的hESC-MSC能够供应毫克范围内的外泌体,为生产具有生物学效益的外泌体提供了一定的可行性。此外,还可以对外泌体进行功能化修饰,进一步增强外泌体的作用优势。外泌体的功能化修饰能够延长外泌体的循环时间、增强外泌体在细胞质的递送效率和促使外泌体具有更强的靶向性。
外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——超高速离心法。其中超高速离心法是常用的,该方法是被誉为分离外泌体的“金标准”。因操作简单,不需要复杂的技术支持,并且成本相对较低而被广fan使用。但是该方法耗时、产率低,得到的外泌体的数量和质量很大程度上受转子的类型、转子沉降角度等因素影响,其中主要的问题就是差速离心法获得的沉淀物是外泌体,但也会有其他的囊泡、蛋白质或蛋白和RNA的聚集体。所以得到的外泌体的纯度和产量都不高。载药的外泌体提纯以后一般会通过静脉注射、皮下注射、腹膜内注射或者中流处注射等方式进行疾病zhiliao。
有研究发现,在外泌体载药系统中,对外泌体的产生环境进行干扰(如,缺氧)能够改变外泌体的分泌组分。Zhu等人研究了缺氧处理的间充质干细胞(MSCs)来源外泌体(ExoH)在心肌修复方面是否优于其在常氧条件下产生的外泌体(ExoN)。在小鼠心肌梗死实验中,ExoH处理的小鼠具有更高的生存率、更小的疤和更好的心脏功能恢复。进一步研究发现,相比于ExoN,ExoH具有更高表达水平的miR-210以及对外泌体分泌至关重要的中性鞘磷脂酶2(nSMase2)的表达。类似地,Zhu等人发现缺氧条件下MSC-Exo递送的miR125b-5p能够通过改善心肌细胞凋亡来促进缺血性心脏修复。此外,他们还将ExoH与缺血心肌靶向肽缀合,构建了一种新型的药物递送载体,增强了缺血性疾病的药物递送特异性。小分子抗ai药物DOX装载于HEK293T细胞来源外泌体内可用于EL4小鼠淋巴瘤模型的抗ai研究。江苏动物细胞样本外泌体载药实验服务
树突细胞分泌的外泌体表面会表达出CD9,有利于加强外泌体与靶细胞的融合,提高外泌体对药物运输的效率。山东超声外泌体载药
姜黄素/外泌体可以明显地减少由脂多糖引起的炎症因子IL-6(白介素-6)和TNF-a(中流坏死因子-α)的释放。在脂多糖引起的炎症模型中,注射姜黄素/外泌体的小鼠组几乎未发生死亡,而注射游离姜黄素药物的小鼠组死亡率接近60%,注射姜黄素/脂质体的小鼠组死亡率接近80%。这说明姜黄素/外泌体对脂多糖引起的感ran性休克有较好的zhiliao效果,从而提高了C57BL/6J模型鼠的存活率。研究者认为,将外泌体作为姜黄素的载体时,可以增加Gr-1+细胞对姜黄素的摄取,从而句有更好的kang炎作用。山东超声外泌体载药
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